Bilaga 1 - Mall/Rubriker för den populärvetenskapliga sammanfattningen
Titel
Tarmflorans påverkan av leverceller och makrofager.
Sökord (key words, max 5
Gallsyrasyntes, makrofager, levern, ER-stress, metabola syndromet.
Syftet med försöket (enligt artikel 5 Direktiv 2010/63/EU)
Att skapa en in vitro modell för att studera metabola processer i levern och i makrofager för att öka kunskapen om hur tarmfloran
åverkar dessa celler. Både leverceller och makrota er har vikti a funktioner vidmetabola- och inflammatoriska s'ukdomar.
Beskriv försökets mål (de vetenskapliga frågorna, eller de vetenskapliga, kliniska behoven som ska mötas)
Målet är att undersöka hur tarmfloran påverkar processer i leverceller och markofager. l levern kommer vi framförallt studerar hur
olika gallsyror produceras i levern och hur detta påverkas av samspelet med bakteriefloran i tarmen. Gallsyror är signalmolekyler
som är involverade i glukos och fettomsättning och kan därför eventuellt fungera som en behandling vid
ämnesomsättningsrelaterade sjukdomar såsom fetma , diabetes och fettleversjukdom. Makrotagerna kommer framförallt
stimuleras med olika fetter för att undersöka hur tarmfloranpåverkar bildandet av sk skumceller vilka bidrar till åderförkalkning.
Vilka potentiella nyttorförväntas komma ur försöket (vilka vetenskapliga framsteg kommer att nås, hur kan människor
eller djur dra nytta av försöket)?
Vilka arter ska användas, och hur många djur?
lMöss, 500
Vilka är de förväntade negativa effekterna på djuren och vilken är den förväntade svårhetsgraden?
Mössen kan känna visst obehag när de sövs med isofluran samt efter injektion med thioglykolat.
3R-aspekter
1. Ersätta (Replace)
Beskriv varför djur måste användas och varför djurfria alternativ inte kan användas
För att studera syntesen i levern krävs primära celler eftersom etablerade cellkulturer som t ex HEPG2 (human liver hepatocellular
prcinoma) celler uppvisar helt andra egenskaper när det gäller syntes och metabolism av gallsyror. Med detta försök skapar vi ett
n vitro system där vi kan behandla cellerna med olika ämnen och slipper därmed utsätta mössen för den behandlingen. Dessutom
j<an ingen cellinje efterlikna skillnaderna mellan bakteriefria och koloniserade möss.
2.Begränsa(Reduce)
Förklara hur man har försäkrat sig om att använda så få djur som möjligt.
Genom att utföra perfusion av levern när musen är sövd kan man isolera många celler med hög kvalitet vilket gör att man kan
minimera antalet möss som krävs. Från en lever kan man isolera mellan 25-50 miljoner hepatocyter vilket räcker till flera olika
typer av försök på en och samma muslever. Liknande antal makrofager förväntas isoleras per mus.
3. Förfina (Refine)
Förklara valet av art och varför den valda djurmodellen är den mest förfinade. Beskriv de insatser som gjorts för att minimera välfärdskostnaderna
för djuren.
Musen är välkaraktäriserad beträffande utveckling av ämnesomsättningsrelateradesjukdomar så som fetma, insulinresistens,
diabetes och åderförkalkning samt dess storlek är lämplig för dessa studier. Det finns även många genetiskt modifierade
musmodeller tillgängliga vilket gör det möjligt att studera enskilda geners påverkan på de olika processerna.
Denna modell är ett sätt att skapa ett in vitro system för att kunna testa olika behandlingars påverkan på leverceller och
makrofager utan att behöva behandla mössen. Vi kan därigenom optimera våra studier in vitro så att antalet möss som sedan
behöver användas för in vivo studier minimeras.
Mössen kommer ha rikligt med berikningsmaterial och kommer att stå under noggrann övervakning.
1Diarienummer
2(8)
Följande ska fyllas i av nämnden
Försöket ska utvärderas i efterhand
OJa
Ii(! Nej
Eventuella tillägg eller ändringar som nämnden har beslutat
